멸균의약품은 다음과 같이 분류할 수 있습니다.최종 멸균 제품, 제조 과정에서 최종 멸균 과정을 거칩니다.무균 제조 제품, 생산 공정의 일부 또는 전부가 무균 조건에서 수행되는 것입니다.

가능하다면 무균 제품은 다음을 사용하여 제조되어야 합니다.최종 가열 멸균. 그러나 열에-민감한 제품의 경우,무균 처리또는멸균 여과대체 멸균 방법으로 채택될 수 있습니다.

그만큼3가 로타바이러스 백신최종 멸균을 할 수 없는 약독화 생백신입니다. 제품의 효능을 보장하기 위해 전체 제조 공정은 무균 조건에서 수행됩니다. 이로 인해 운영 복잡성이 크게 증가하고 고도로 숙련된 제조 인력이 필요합니다.

백신 중간체의 준비는 백신 제제에서 가장 중요한 단계 중 하나입니다. 이 공정의 무균성은 최종 제품의 안전성과 전체 제조 비용에 직접적인 영향을 미칩니다. 따라서멸균 여과 단계중간 준비 중 오염 위험을 줄이면서 제품 품질을 보장하는 데 매우 중요합니다.

효율적인 다운스트림 처리는 빠르게 성장하는 바이오의약품 산업이 직면한 주요 과제 중 하나가 되었습니다. 바이러스 및 바이러스와 같은 입자의 상대적으로 큰 입자 크기-(대략100~400nm) 멸균 여과의 복잡성이 더욱 증가합니다.

 

 

 

이 연구는 다음과 같이 구성되었습니다.두 단계중간체 준비 중 멸균 여과 단계 도입의 영향을 사전 평가하기 위해 3가 로타바이러스 백신 중간체에 대한 실험실{0}}규모 여과 실험을 수행합니다.

동안첫 번째 단계, 여과 전후의 바이러스 역가는 다양한 막 공극 크기와 막 재료를 사용하여 평가되었습니다.

 

1단계에서 얻은 좋은 결과를 바탕으로,두 번째 단계동일한 멤브레인 재질과 기공 크기를 가진 멸균 필터를 사용하는 동시에 실험 규모와 생산 배치 수를 모두 확대했습니다. 여과 전후의 바이러스 역가 및 물리화학적 특성을 평가했습니다. 또한, 3가 로타바이러스 백신이 필터의 박테리아 보유 성능에 영향을 미치는지 여부를 확인하기 위해 선택한 멤브레인에 대해 박테리아 보유 테스트를 수행했습니다.

본 연구에 사용된 여과막은0.22μm 폴리비닐리덴 플루오라이드(PVDF) 멤브레인. 바이러스 역가, 외관, pH, 삼투압 및 투명도에 대한 멸균 여과의 효과를 조사하는 동시에 박테리아 보유 성능도 평가했습니다.

결과는0.22μm PVDF 멸균 필터가졌다큰 효과 없음3가 로타바이러스 백신 중간체의 바이러스 역가, 외관, pH 또는 삼투압에 대해. 그러나 그들은제품 선명도 대폭 향상이는 멸균 여과가 백신 효능을 손상시키지 않으면서 제품 품질을 효과적으로 향상시킬 수 있음을 나타냅니다.

 

표 1. 6개 중간 배치(1단계)의 여과 전후 바이러스 역가 비교

 

 

표 2. 16개 중간 배치(2상)의 여과 전후 바이러스 역가의 통계 분석

 

 

 

표 3. 박테리아 잔류 테스트에 대한 매개변수 요약

 

 

참고:1.총 여과량=최소 유량 × 재순환 시간 + 최종 여과량.

 

표 4. 세균 보유 테스트 결과

 

 

참고:

1.막 챌린지 수준=최종 박테리아 현탁액 농도 × 최종 여과량 / 유효 여과 면적(13.8cm²).

2.TNTC이는 콜로니의 수가셀 수 없을 정도로 많습니다(TNTC).

 

논의

여과 매체, 공정 조건 및 멸균 필터는 멸균 여과 성능에 영향을 미치는 세 가지 주요 요소입니다. 3가 로타바이러스 백신 중간체의 특성과 해당 공정 조건에 맞는 막 재료를 선택하는 것은 성공적인 멸균 여과를 위한 기본 전제 조건입니다.

친수성폴리비닐리덴 플루오라이드(PVDF)멤브레인은 생물의약 산업에서 최종 멸균 여과를 위해 널리 사용됩니다.높은 투과성, 높은 유속, 낮은 단백질-결합 특성, 추출성 최소화, 뛰어난 화학적 호환성. 이 연구의 결과는 선택된 PVDF 멤브레인이 3가 로타바이러스 백신 중간체의 특성에 매우 적합하다는 것을 추가로 입증합니다. 이 막을 이용한 멸균여과는큰 효과 없음외관, pH 및 삼투압을 포함한 바이러스 역가 또는 물리화학적 특성에 대해제품 선명도 대폭 향상하여 백신 품질 향상에 기여합니다.

 

바이러스 역가는 바이러스 백신의 가장 중요한 품질 특성 중 하나이며 제품 효능과 전반적인 품질을 직접적으로 나타내는 지표입니다. 결과적으로 이는 멸균 여과의 영향을 평가할 때 가장 중요한 매개변수를 나타냅니다.

 

총 1회에 걸쳐 얻은 결과중간 여과 배치 22개를 이용한 예비여과 과정을 보여주었다.0.22μm PVDF 멤브레인역가에 대한 제품 요구 사항을 완전히 충족했습니다.G2, G3, G4 바이러스 균주, 총 결합 바이러스 역가도 포함됩니다.

 

이전 연구에서는 멸균 여과가 바이러스 역가 손실의 중요한 원인이 될 수 있으며 바이러스 농도가 여과 성능에 영향을 미치는 요인 중 하나라고 보고했습니다. 본 연구에서는 바이러스 역가 범위가 다른 중간체를 멸균 여과했습니다. 결과는 여과가 생성되었음을 나타냅니다.바이러스 역가가 통계적으로 유의미하게 감소하지 않음다음 농도 범위 내에서:

• 1단계:4.50–7.80lgCCID₅₀/mL
• 2단계:4.70–8.10 lgCCID₅₀/mL

이러한 발견은 평가된 바이러스 농도 범위 전반에 걸쳐 백신 효능을 손상시키지 않으면서 멸균 여과를 시행할 수 있음을 시사합니다.

3가 로타바이러스 백신 전시살균 활성 없음~에 맞서브레분디모나스 디미누타ATCC 19146. 이 관찰을 바탕으로 박테리아 보유 연구가 수행되었습니다.

결과는 로타바이러스 백신이 입증되었습니다.0.22μm 친수성 PVDF 멸균-등급 멤브레인의 성능에 부정적인 영향을 미치지 않았습니다.. 멤브레인은 살균-등급 여과 표준을 성공적으로 달성했습니다.1.0 × 10 이상브레분디모나스 디미누타유효 여과 면적 cm²당 ATCC 19146 셀, 백신 제제가 멸균 필터의 세균 보유 능력을 손상시키지 않음을 확인합니다.

 

 

참조

통 Y., 첸, T., 푸, S.,외. 3가 로타바이러스 백신 생산 과정에서 멸균 여과의 예비 적용. 중국 제약 저널, 2024, 55(1):120~124. DOI:10.16522/j.cnki.cjph.2024.01.016.